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猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在毕赤酵母中的分泌表达

文献类型： 中文期刊

作者： 康雪燕 1 ; 张莉 2 ; 姜世金 1 ; 张培君 2 ;

作者机构： 1.山东农业大学

2.北京市农林科学院

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;纤突糖蛋白;巴斯德毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2010 年 21 卷 02 期

页码： 222-226

摘要： 目的:利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突糖蛋白S。方法:根据GenBank中猪TGEV纤突糖蛋白S全基因设计一对引物,并在5'引物和3'引物中引入EcoRⅠ、NotⅠ酶切位点,2.2kb的目的基因S经PCR扩增后克隆于pBS-T载体,再将S基因经双酶切从T载体切下并与穿梭质粒pPIC9k连接,SalⅠ线性化重组穿梭质粒pPIC9k-S,电转化于毕赤酵母GS115感受态细胞,G418筛选鉴定阳性重组子,经甲醇诱导,SDS-PAGE检测诱导后上清。结果:对pPIC9k-S重组酵母表达载体的测序证实已成功克隆了猪TGEVS基因;重组酵母菌诱导表达后,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的相对分子质量约为82×103,且S蛋白以可溶性形式分泌表达于胞外。结论:利用巴斯德毕赤酵母真核表达系统成功表达了猪传染性胃肠炎病毒(河北分离株)纤突糖蛋白S。

  • 相关文献

[1]猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在毕赤酵母中的分泌表达. 张莉,康雪燕,张培君. 2009

[2]猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在转基因玉米中的表达. 曾作财,许承扬,张晓东,王金洛,杨兵,李国平. 2012

[3]巴斯德毕赤酵母表达系统在动物传染病防制中应用的研究进展. 孙静,孙惠玲,张培君. 2008

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[8]猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定. 周宏专,覃湘婕,杨兵,徐福洲,满坤,苏霞,张晓东,刘爵,罗绪刚,王金洛. 2014

[9]转TGEV-S基因玉米中目的基因的PCR检测及优化. 覃湘婕,周宏专,杨兵,徐福洲,薛静,张晓东,王金洛. 2014

[10]转TGEV-S基因玉米中目的基因的PCR检测及条件优化PCRdetectionofthetargetgeneintransgenicmaizederivedspikeglycoproteingeneofporcinetransmissiblegastroenteritisvirus. 覃湘婕1,2,周宏专2,3,杨兵2,徐福洲2,薛静2,张晓东2,王金洛2*TANXiangjie1,2,ZHOUHongzhuan2,3,YANGBing2,XUFuzhou2,XUEJing2,ZHANGXiaodong2,WANGJinluo2*. 2014

[11]猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点序列的克隆与原核表达. 张春叶,张莉,沈红,李焕荣,吴国娟,于同泉,路苹. 2007

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[13]毕赤酵母表达的猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白及其免疫原性分析. 张莉,康雪燕,章振华,李永清,盖丽丽,姜世金,张培君. 2015

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