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香蕉乙烯受体基因RNA干扰表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 冯斗 1 ; 张春发 1 ; 张颖 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 乙烯受体基因;RNA干扰;植物表达载体;香蕉

期刊名称： 广西农业生物科学

ISSN： 1008-3464

年卷期： 2004 年 23 卷 02 期

页码： 149-153

收录情况： CSCD

摘要： 设计两对引物,PCR扩增香蕉乙烯受体基因cDNA序列自AUG启始密码子起长538bp区段的正向(记为5'I)、反向(记为AI')DNA区段。构建含该正、反向互补重复序列DNA片段的中间载体,经测序证实连接正确后,克隆到植物表达载体pCAMBIA-1301中的GUS基因位置并经双酶切证实。在所得表达载体pCAMBIA-1301-S5'I-AI'中,该插入正反互补重复片段处于35S启动子之后,由此转录的mRNA因两端序列反向互补而形成发夹式RNA,因此可应用于RNA干扰研究。同时,文中对构建含正、反向重复序列插入片段植物表达载体过程中出现的插入片段链内退火引起连接困难等问题进行了分析讨论。

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