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棉花半乳糖基转移酶基因GhGalT1启动子的克隆及表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 秦丽霞 1 ; 李静 2 ; 张换样 2 ; 李盛 2 ; 竹梦婕 2 ; 焦改丽 2 ; 吴慎杰 3 ;

作者机构: 1.山西省农业科学院棉花研究所

2.;山西省农业科学院棉花研究所

3.;山西省农业科学院棉花研究所;

关键词: 棉花;糖基转移酶;启动子;顺式作用元件;GUS组织化学染色;GUS定量分析

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2018 年 02 期

页码: 218-226

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 糖基转移酶(glycosytransferase,GT)是催化活化的供体糖基转移到特异受体生成糖苷键的酶类,在应答多种生物和非生物胁迫中起重要作用。本研究利用PCR技术从陆地棉品种Coker 312基因组中分离克隆了GhGalT1基因的启动子,序列长度为539 bp,命名为pGhGalT1。启动子分析软件Plant CARE分析表明pGhGalT1含有CAAT-box、TATA-box核心元件,以及响应干旱、热、脱水、防御与胁迫应答的顺式作用元件MBS、HSE、MYCCONSE、TC-rich repeats和CGTCA-motif等。因此将pGhGalT1构建到启动子检测载体p BI101-GUS上,形成p BI101-pGhGalT1-GUS融合表达载体,以检测其启动子活性。通过农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,经卡那霉素抗性筛选及PCR检测成功获得阳性转基因植株。对T3代转基因拟南芥进行组织化学染色分析显示该启动子主要在生长5~15 d的幼苗主根及侧根根尖表达,在子叶及莲座叶边缘也有微弱表达。非生物胁迫和激素处理后的组织化学染色、GUS酶活性及GUS基因定量分析结果显示GhGalT1基因的启动子受盐、渗透胁迫和激素(6-BA、MeJA、BL)的诱导,该结果为合理选用启动子改良作物提供理论依据。

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