文献类型: 中文期刊
作者: 何丽鸿 1 ; 于荣利 2 ; 陈明杰 3 ; 潘迎捷 3 ;
作者机构: 1.中华人民共和国农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室
2.上海市食用菌工程技术研究中心
3.上海市农业科学院食用菌研究所
关键词: 双孢蘑菇;培养料后发酵;细菌16S rDNA文库
期刊名称: 食用菌学报
ISSN: 1005-9873
年卷期: 2008 年 15 卷 04 期
页码: 11-15
收录情况: 北大核心
摘要: 采用化学裂解和酶解相结合的方法,以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系,用PEG- 8000进行DNA沉淀.从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA,再以总DNA为模板,以专用引物F27和R1498进行PCR扩增,获得16S rDNA片段,经纯化后构建4个时期样品的细菌16S rDNA文库。试验结果表明,本试验获得的总DNA质量较好。采用PCR扩增可获得多个细菌、放线菌和真菌特异片段;细菌16S rDNA文库的目的片段插入效率在90%以上。
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