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巴西橡胶树HbMADS4的克隆及原核表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 魏利然 1 ; 李辉亮 2 ; 郭冬 2 ; 杨子平 1 ; 彭世清 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 巴西橡胶树;MADS-box转录因子;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2015 年 36 卷 05 期

页码： 888-894

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探讨巴西橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制,通过抑制缩减杂交获得了在巴西橡胶树自根幼态无性系和老态无性系胶乳中差异表达的基因片段。为进一步鉴定差异表达基因的功能,对相关基因进行克隆。通过RACE方法克隆一个新的橡胶树MADS-box转录因子基因(命名为Hb MADS4),Hb MADS4全长984 bp,含有633 bp的阅读框,编码230个氨基酸。推测Hb MADS4蛋白分子量为23.71 ku,等电点为7.61,在N端含有典型的MADS-box结构域。构建Hb MADS4原核表达载体p Hb MADS4,将其转化E.coli,经优化条件后,在20℃,0.1 mmol/L IPTG诱导4 h的条件下,获得Hb MADS4融合蛋白。Hb MADS4的克隆和Hb MADS4融合蛋白的获得为深入研究Hb MADS4的功能奠定基础。

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