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农杆菌介导的燕麦创伤胚转化体系研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张丽君 1 ; 刘龙龙 2 ; 孙毅 3 ; 张建珍 1 ; 崔林 2 ;

作者机构： 1.山西大学应用生物学研究所

2.山西省农业科学院农作物品种资源研究所

3.山西省农业科学院生物技术研究中心

关键词： 燕麦;转化体系;Bar基因;农杆菌介导

期刊名称： 河北农业科学

ISSN： 1008-1631

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 49-54+76

摘要： 通过建立遗传转化体系,培育具有特定功能的转基因作物品种对改善作物的生存能力和生态环境适应力具有重要意义。参照农杆菌划胚介导植物萌发种子基因转化方法,以农杆菌菌株LBA4404(含质粒p CAMBAR.CH I.11)侵染转化燕麦种子,对转化体系中的菌液浓度、超声波功率、种子处理方式和抗除草剂筛选等不同转化条件分别进行了研究,以探索农杆菌介导的燕麦最适宜的遗传转化体系。结果表明:燕麦种子浸泡4 h后采用穿刺法划伤种子,1 000 W超声波处理划伤种子10 min,在OD600=0.4的农杆菌溶液中共培养2 d,最有利于种子转化;用0.8 mg/L草丁膦溶液与种子共培养能够有效抑制种子萌发进行初筛,用1 mg/L草丁膦溶液喷施幼苗进行除草剂抗性筛选,能够明显抑制假阳性苗的生长;将来自链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)的Bar基因导入燕麦,经除草剂筛选以及Bar基因的PCR检测和Southern杂交分析证明获得转基因植株。

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