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甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究(英文)

文献类型： 中文期刊

作者： 张增福 1 ; 董建力 2 ; 李明 3 ;

作者机构： 1.宁夏农业技术推广总站

2.宁夏农林科学院农业生物技术研究中心

3.宁夏农林科学院沙漠化治理研究所

关键词： 甘草;DNA;RAPD-PCR;反应体系;优化;正交试验

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2011 年 10 期

页码： 1427-1429

摘要： [目的]建立一套适合甘草分子学研究的RAPD-PCR反应体系。[方法]以甘草种质为试材,采用正交试验法设计,对影响RAPD-PCR扩增的主要因素dNTPs、引物、Taq酶和DNA模板进行优化筛选。[结果]总体积25μl的甘草RAPD-PCR最佳反应体系为:10×PCR缓冲液(含MgCl2)2.5μl,10mmol/LdNTPs2.5μl,50ng DNA2μl,10μmol/L引物2μl,5UTaq酶0.4μl。对引物的退火温度进行了梯度筛选,34℃时扩增效果较好。[结论]进行甘草RAPD-PCR反应体系的正交优化非常有效。

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