文献类型: 中文期刊
作者: 安飞飞 1 ; 齐剑雄 1 ; 陈松笔 1 ; 罗秀芹 1 ; 蔡杰 1 ; 薛晶晶 1 ;
作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业农村部木薯种质资源保护与利用重点实验室
关键词: 木薯;查尔酮合酶;qRT-PCR;克隆;表达分析
期刊名称: 热带作物学报
ISSN: 1000-2561
年卷期: 2023 年 44 卷 012 期
页码: 2384-2391
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是类黄酮合成途径的第一个限速酶,在植物花色形成、生长发育以及非生物胁迫中发挥着重要作用.为明确木薯MeCHS基因家族的特性及在木薯块根采后腐烂(PPD)中的表达,本研究利用生物信息学方法对木薯 MeCHS 基因家族成员进行理化性质、蛋白质结构等分析.采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测MeCHS 基因在不同品种、不同组织及块根 PPD 过程中的表达情况,同时克隆并构建 3 个高表达的MeCHS基因的亚细胞定位载体并进行烟草瞬时转化以确定其定位.在木薯基因组中共鉴定出 5 个MeCHS基因家族成员,蛋白质二级结构以α-螺旋和不规则卷曲为主.qRT-PCR分析发现:MeCHS基因表达具有明显的组织特异性,在茎中表达水平最高;在木薯中主要表达的MeCHS基因为MeCHS1、MeCHS2 和MeCHS3,且 3 个基因随着SC8 块根贮藏时间的延长表达量逐步升高.将成功克隆得到的MeCHS1、MeCHS2和MeCHS3基因经农杆菌介导瞬时转化烟草下表皮细胞,显微观察表明 3 个基因均定位于细胞质,与预测结果相符.该研究结果可为进一步揭示木薯MeCHS基因家族的功能与提高木薯块根耐PPD能力提供理论依据.
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