文献类型： 中文期刊

作者： 郑雪芳 ¹ ; 舒江霞 ² ; 林莹 ² ; 王阶平 ² ; 陈燕萍 ² ; 陈梅春 ² ; 陈峥 ² ; 刘波 ² ;

作者机构： 1.福建省农业科学院资源环境与土壤肥料研究所

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关键词： 青枯雷尔氏菌;连续传代培养;DNA甲基化;甲基化敏感扩增多态性

期刊名称： 微生物学报

ISSN：

年卷期： 2024 年 008 期

页码： 2986-2997

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]探究不同致病力青枯雷尔氏菌连续传代过程中致病力、DNA甲基化水平与模式的变化.[方法]将不同致病力青枯雷尔氏菌连续传代培养50次,通过弱化指数(attenuated index,AI)和接种番茄盆栽苗,分析其F₁和F₅₀菌株致病力变化;采用甲基化敏感扩增多态(methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术分析不同致病力和传代数青枯雷尔氏菌DNA甲基化水平变化;利用荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)技术分析DNA甲基化和去甲基化相关酶基因的表达量变化.[结果]经连续传代50次后,强致病力菌株FJAT15304和过渡型菌株FJAT445均变为无致病力菌株,而无致病力菌株FJAT15249仍然保持其无致病力特性.MSAP分析显示,与F₁菌株相比,强致病力菌株传代50次的FJAT15304.F₅₀和致病力衰退型菌株传代50次的FJAT445.F₅₀的总甲基化率分别增加7.82%和38.22%;无致病力菌株FJAT15249的F₁和F₅₀的总甲基化率均为33.33%;强致病力和过渡型菌株的主要甲基化模式为全甲基化,其全甲基化率高于半甲基化率,而所有无致病力菌株主要甲基化模式为半甲基化.qRT-PCR分析表明,强致病力和过渡型菌株连续传代致病力衰退菌株的DNA甲基化酶相关基因dam、dcm和ftsZ表达量显著增加,而去甲基化酶相关基因alkB表达量显著降低,推测DNA甲基化水平变化在致病力衰退过程起重要作用.[结论]青枯雷尔氏菌连续传代出现致病力衰退现象,这种致病力衰退可能与DNA甲基化水平有关.本研究为利用无致病力菌株防治青枯病害提供依据.