文献类型： 中文期刊
作者： 陈龙军 1 ; 陈济琛 1 ; 林晓栩 1 ; 邱宏端 1 ; 林新坚 1 ; 蔡海松 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院土壤肥料研究所;福州大学生物科学与工程学院
关键词： 嗜热芽孢杆菌CHB1;环糊精酶;密码子优化;毕赤酵母
期刊名称： 食品与生物技术学报
ISSN： 1673-1689
年卷期： 2018 年 09 期
页码： 994-999
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为实现新型CGTase在毕赤酵母中的高效表达,提取嗜热芽孢杆菌CHB1基因组DNA为模块,PCR扩增野生型基因CGT1,编码680个氨基酸。将该基因进行密码子优化CGT2,与野生型基因CGT1分别插入分泌型载体pPICZαA转化毕赤酵母GS115,获得两株酵母工程菌GS115/pPICZαA-CGT1和GS115/pPICZαA-CGT2;经甲醇诱导表达120 h后,CGT2活力达0.62U/mL,是优化前CGT1(0.37 U/mL)活性的1.7倍;进一步对GS115/pPICZαA-CGT2进行摇瓶发酵条件优化,确定其最优发酵条件为:pH 6.5、28℃、200 r/min、每24小时补加体积分数1.5%的甲醇诱导,120 h后其胞外酶活力达到1.26 U/mL,是优化前的两倍。
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