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伪狂犬病病毒Ea株ORF-1基因在BHK-21细胞上的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 徐引弟 1 ; 陈焕春 2 ; 肖少波 2 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院

2.华中农业大学

关键词： 伪狂犬病病毒;ORF-1基因;克隆;表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2009 年 2009 卷 03 期

页码： 101-104

收录情况： 北大核心

摘要： 以伪狂犬病毒Ea株BamHⅠ5′片段为模板,PCR扩增出约0.6kbORF-1基因完整编码区序列,将该基因克隆到pBluescriptⅡSK+中,构建重组载体pSKORF1。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白EGFP下游,构建真核表达载体pEGFPORF1,脂质体法转染BHK-21细胞,G418加压筛选至正常细胞完全死亡。在倒置荧光显微镜下观察,可见pEGFPORF1转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出较强的荧光,证明ORF-1基因在BHK-21细胞中获得了表达。

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