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改良CTAB方法提取果树不同组织的RNA

文献类型： 中文期刊

作者： 关玲 1 ; 赵密珍 1 ; 王庆莲 1 ; 吴伟民 1 ; 钱亚明 1 ; 巫建华 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院果树研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;江苏现代园艺工程技术中心

关键词： 果树;CTAB;RNA提取;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2018 年 15 期

页码： 19-22

收录情况： 北大核心

摘要： 果树多富含多酚、多糖等次生代谢物质。为了解决果树RNA提取工作较为困难的现象,拟改良现有的十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)方法,以将其用于提取多年生草本、藤本及木本果树RNA。经非变性琼脂糖凝胶电泳检测,表明应用该方法可以获得清晰明亮的RNA条带;经核酸分析发现,所提取的RNA的D260 nm/D280 nm值均在1.80~1.93之间,表明该方法可以去除果树中的蛋白质;D260 nm/D230 nm值为2.03~2.27,表明该方法可以去除果树中的多糖及小分子盐离子。结果表明,应用改良后的CTBA方法提取果树不同组织RNA所得到的反转录cDNA可以直接用于后续的逆转录PCR(RT-PCR)试验。

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