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发根农杆菌介导的甜瓜CRISPR/Cas9系统靶位点的检测

文献类型： 中文期刊

作者： 朱蕾 1 ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院大庆分院

关键词： 甜瓜;CRISPR/Cas9;发根农杆菌;基因敲除

期刊名称： 中国瓜菜

ISSN：

年卷期： 2024 年 008 期

页码： 15-23

摘要： 选取甜瓜栽培材料龙庆八号作为受体材料,构建CmCURT1A基因CRISPR/Cas9基因编辑载体,经发根农杆菌介导检测靶位点的编辑情况,为后续甜瓜遗传转化试验提供载体基础.以甜瓜CmCURT1A基因(ID:MELO3C006053.2)为靶基因构建双靶位点敲除载体,经发根农杆菌K599介导的简单遗传转化技术使甜瓜组织长出不定根,经PCR测序发现在不定根中分别存在65 bp、72 bp不同碱基片段的缺失.该方法成功进行了甜瓜CRISPR/Cas9载体靶位点敲除情况的检测,简单高效,实现了在甜瓜中基因编辑靶点的快速鉴定,为研究甜瓜基因功能和遗传改良奠定基础.

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