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转耐盐基因水稻的PCR检测方法及其分子辅助育种

文献类型: 中文期刊

作者: 邓汉超 1 ; 侯红利 1 ; 王学林 1 ; 易俊良 2 ; 周少川 2 ; 莫洁华 1 ; 刘倩琪 1 ; 温凯 1 ; 周向阳 1 ;

作者机构: 1.农业部农产品种子质量监督检验测试中心

2.广东省农业科学院水稻所

关键词: 转基因水稻;PCR;标记辅助选择

期刊名称: 种子

ISSN: 1001-4705

年卷期: 2012 年 31 卷 06 期

页码: 10-14

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 研究采用改良CTAB法和磁珠自动提取法提取水稻种子基因组DNA,通过对水稻内源SPS基因、ThST3和Ubiquit-in启动子间构建特异序列进行PCR扩增,扩增产物结合排枪凝胶电泳实现快速检测。其中PCR扩增内源SPS基因的结果表明,采用改良CTAB法和磁珠自动提取法可用于市售水稻种子和转基因种子的DNA提取。实验合成的构建特异引物以及建立的PCR扩增反应体系能特异性地检测转耐盐基因水稻Theli。该方法检测灵敏度高,绝对检测低限达17.3×10-2ng,相对检测低限为0.41%,能有效地对转基因水稻ThST 3进行鉴定;稳定性好,可完全满足转基因水稻的定性检测、监督和标识管理需要。同时可用于对转基因水稻的辅助选择(MAS)育种。

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