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表达绿色荧光蛋白的猪胚胎生殖细胞分离

文献类型： 中文期刊

作者： 芮荣 1 ; 邱妍 1 ; 胡元亮 1 ; 范必勤 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.江苏省农业科学院畜牧研究所

关键词： 猪;胚胎生殖细胞;增强型绿色荧光蛋白;转染

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2004 年 27 卷 04 期

页码： 92-95

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以质粒DNA为增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的载体 ,对处于快速增殖期的 8株猪胚胎生殖 (EG)细胞 (4～ 9代 )进行转基因试验。用 1μgDNA和 2 μLLipofecTamine 2 0 0 0转染EG细胞后 ,共获得 4株转染EGFP基因的EG细胞系 (EG EGFP) ,可发出强绿色荧光 ;EG EGFP细胞连续培养 2周以上可分化为多种细胞类型。显微注射EG EGFP细胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵周隙内或囊胚腔中 ,共注射 135枚胚胎 ,其中 112枚存活并发育至囊胚 (83 0 % ) ;86枚嵌合体胚培养后含有荧光细胞 ,其中 5 7枚囊胚在内细胞团 (ICM)上发现有EG EGFP细胞。

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