文献类型： 中文期刊

作者： 秦艳红 ¹ ; 鲁书豪 ¹ ; 文艺 ¹ ; 高素霞 ¹ ; 李绍建 ¹ ; 刘玉霞 ¹ ; 王飞 ¹ ; 鲁传涛 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院植物保护研究所

关键词： 地黄花叶病毒;反转录环介导等温扩增(RT-LAMP);快速检测

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2024 年 50 卷 006 期

页码： 246-253

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 基于反转录环介导等温扩增（reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP）技术建立了针对地黄花叶病毒（Rehmannia mosaic virus, ReMV）的快速、特异、灵敏的RT-LAMP检测方法。根据ReMV外壳蛋白（coat protein, CP）基因的核苷酸序列设计了3组LAMP引物，通过引物筛选确定最佳引物组合；利用电泳检测及可视化方法（加SYBR GreenⅠ显色剂）进行RT-LAMP温度优化、特异性检测、灵敏度比较。结果表明：本研究建立的RT-LAMP方法最适检测温度为60℃,优化后的LAMP方法能特异性检测ReMV,灵敏度是常规PCR的1 000倍，可检测到1.2×10^-1拷贝/μL的模板浓度。对60份地黄样品的检测结果表明，RT-LAMP方法的阳性检出率为98.3%,高于常规RT-PCR方法（75%）。本研究建立的RT-LAMP检测技术为ReMV的准确检测提供了快速、高效的方法。