文献类型： 中文期刊
作者： 刘成倩 1 ; 李红 1 ; 陈斌 1 ; 易建中 1 ;
作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 西尼罗河病毒;杆状病毒表达系统;prM+E蛋白
期刊名称： 上海农业学报
ISSN： 1000-3924
年卷期： 2018 年 03 期
页码： 72-77
收录情况： CSCD
摘要： 采用PCR技术扩增prM+E基因,将其插入到供体质粒pFast-Bac1中得到重组质粒Pfast-Bac1-W-PE,之后转化大肠杆菌DH10-Bac,构建包含西尼罗河病毒prM+E基因的重组杆状病毒,然后感染正常的sf9细胞,收集感染不同时间段的细胞及上层培养基。结果表明:在感染后的第1天目的基因就得到了转录,同时有少量的重组杆状病毒释放到培养基中;SDS-PAGE和Western-Blot检测结果显示,在43.0ku与66.0ku条带之间,感染细胞裂解液较正常细胞的裂解液多出一条带,该蛋白为WNV完整的E蛋白,而且这一差异蛋白能与WNV兔多抗反应。
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