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兔源F型多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王锦祥 1 ; 孙世坤 1 ; 陈岩峰 1 ; 陈冬金 1 ; 桑雷 1 ; 谢喜平 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 兔;F型多杀性巴氏杆菌;fcbD基因;LAMP快速检测方法;

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2022 年 003 期

页码： 490-495

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立检测兔源F型多杀性巴氏杆菌的快速检测方法，本试验根据F型多杀性巴氏杆菌fcbD基因的保守序列设计了2对特异性引物，经反应条件优化，建立了检测兔源F型多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法。结果显示，该LAMP快速检测方法的最优反应条件为：外引物和内引物的浓度比为1∶7、反应温度为65℃、反应时间为60 min。该方法特异性强，对兔源A型和D型多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和阴性对照（灭菌ddH2O）均无交叉反应。该方法敏感性高，最低检出限为1×10~2拷贝/μL的兔源F型多杀性巴氏杆菌基因组DNA,是普通PCR方法的10倍。此外，该方法重复性好，准确性高。该方法的建立为兔源F型多杀性巴氏杆菌的快速检测提供了有力的技术支撑。

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