文献类型： 中文期刊

作者： 皇甫海燕 ¹ ; 燕孟娇 ¹ ; 宋培玲 ¹ ; 郝丽芬 ¹ ; 皇甫九茹 ¹ ; 贾晓清 ¹ ; 李子钦 ¹ ;

作者机构： 1.内蒙古农牧业科学院

关键词： Leptosphaeria biglobosa;pgip;去信号肽;毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2015 年 30 卷 06 期

页码： 27-31

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探讨PGIP蛋白与PG的互作及pgip基因在油菜抗黑胫菌病中的作用,根据Gen Bank中油菜pgip9、pgip15CDS序列设计引物,并去掉信号肽序列,以接种黑胫病病原菌Leptosphaeria biglobosa(菌株NM-1)7 d后油菜叶片总RNA反转录的c DNA为模板,PCR扩增出pgip9、pgip15除信号肽以外的编码区片段,并克隆到巴斯德毕赤酵母表达载体p PICZαA中构建重组质粒p PICZαA-pgip9、p PICZαA-pgip15。重组质粒经单、双酶切、菌落PCR筛选鉴定后热激化法转化酵母细胞PMAD16,再经ZeocinTM的YPD平板和菌落PCR筛选鉴定,经甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot检测,均在36~37 k Da处出现单一的蛋白条带,蛋白分泌表达成功。通过对pgip基因的体外表达,为探讨PGIP蛋白与PG的互作及pgip基因在抗油菜黑胫菌病中的作用奠定基础。