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山葡萄黄烷酮-3-羟化酶基因及其启动子的克隆与表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张宇 1 ; 袁金华 2 ; 唐铭浩 1 ; 栾佳兴 3 ; 刘海峰 1 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院(中国农业科技东北创新中心)

2.延边大学农学院

3.长春市南关区十一高中南溪学校

关键词： 山葡萄;黄烷酮-3-羟化酶;启动子;顺式作用元件

期刊名称： 北方园艺

ISSN： 1001-0009

年卷期： 2025 年 012 期

页码： 1-7

收录情况： 北大核心

摘要： 以山葡萄（Vitis amurensis）‘双红’品种为试材，采用CTAB法提取山葡萄果皮中RNA与叶片中cDNA,对‘双红’黄烷酮-3-羟化酶基因（flavanone-3-hydroxylase,F3H）及其启动子进行克隆，并进行F3H蛋白质的原核表达和启动子不同缺失片段的瞬时表达，研究了山葡萄不同种类花色苷的形成机理，以期为花色苷的实际生产提供参考依据。结果表明：‘双红’品种F3H完整开放阅读框1 091 bp,启动子序列1 454 bp,采用生物信息学软件分析发现，F3H理化性质较‘双丰’品种有所差异，其启动子序列中除具有核心启动子元件CAAT-box和TATA-box外，还有一系列光响应元件，以及其他参与不同种类生物调控的顺式作用元件，转化烟草叶片进行瞬时表达后，β-葡萄糖苷酸酶（GUS）活性有所差异，随着启动子缺失片段长度的增加而呈现先下降后上升的趋势。通过对F3H重组蛋白体外表达条件的探究，当控制变量温度为25℃、培养时间为7 h、IPTG浓度为0.8 mmol·L-1的条件下，上清样品中目的蛋白表达量最高。

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