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葡萄炭疽病可视化LAMP检测体系的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王贤达 1 ; 郑巧美 2 ; 陈婷 1 ; 刘鑫铭 1 ; 蔡盛华 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院果树研究所

2.福建农林大学园艺学院

关键词： 葡萄炭疽病;钙黄绿素;环介导等温扩增(LAMP);检测

期刊名称： 果树学报

ISSN： 1009-9980

年卷期： 2016 年 03 期

页码： 366-373

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立葡萄炭疽病LAMP检测方法。【方法】在葡萄炭疽病菌ITS序列片段设计LAMP特异性引物,优化反应条件,建立葡萄炭疽病LAMP检测体系,并利用荧光显色剂(0.05 mmol·L-1钙黄绿素和0.5 mmol·L-1氯化锰混合液)实现检测结果的可视化;同时对该体系进行特异性和灵敏度的验证,对采集自5个地区的田间样品进行实测。【结果】除染病的待检样品有特异性反应,观察到亮绿色荧光信号外,其他供试菌株均无特异性扩增反应;对葡萄发病组织总DNA的检测灵敏分别是定量PCR和常规PCR的1/10和100倍,检测限达到了5×10-4mg·L-1;对来自福建等5个地区的样品进行实测,结果表明待检样品中有81.5%感染葡萄炭疽病菌,该检测结果与定量PCR的检测结果完全一致。【结论】本研究建立了一种基于荧光显色的可视化LAMP检测体系,该体系可用于葡萄炭疽病的田间样品检测。

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