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农杆菌介导南瓜遗传转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 付洪冰 1 ; 崔崇士 1 ; 赵曦 2 ; 刘琦 2 ;

作者机构: 1.东北农业大学园艺学院

2.黑龙江省农业科学院生物技术研究所

关键词: 根癌农杆菌;南瓜;遗传转化;PCR;Southernblot

期刊名称: 植物学报

ISSN: 1674-3466

年卷期: 2010 年 45 卷 04 期

页码: 472-478

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以南瓜金辉一号(Cucurbita moschata' Jinhui1')为实验材料,利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化南瓜子叶节,研究了预培养时间、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度和共培养时间,抗生素羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)以及筛选剂卡那霉素(Kan)等因素对离体不定芽的影响,建立了南瓜最适遗传转化体系。结果表明:外植体预培养0天,侵染时间30分钟,AS浓度为100mg·L-1,共培养5天可获得最高遗传转化效率;最适除菌剂为Cef,其最适浓度为500mg·L-1;最适Kan筛选浓度为100mg·L-1;在MS培养基上培养抗性芽生根,经PCR和Southern blot检测,证明为转基因植株。

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