文献类型: 中文期刊
作者: 李红 1 ; 刘成倩 1 ; 易建中 1 ;
作者机构: 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: Pleiotrophin;原核表达;条件优化
期刊名称: 上海农业学报
ISSN: 1000-3924
年卷期: 2016 年 32 卷 03 期
页码: 67-71
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据GenBank上公布的Ptn核苷酸序列设计1对引物,利用RT-PCR的方法扩增出人类Ptn基因,将其克隆到原核表达载体pET-30a上,得到重组质粒pET-30a-Ptn。将重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞并进行表达条件优化,经SDS-PAGE电泳及Western Blotting分析表明,融合蛋白在0.5 mmol/L IPTG、37℃条件下诱导3 h表达量最高,其分子质量约24.9 kD,表达产物主要以包涵体形式存在,且表达的融合蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。
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