文献类型： 中文期刊

作者： 卢清侠 ¹ ; 金前跃 ¹ ; 冯丽丽 ² ; 柴永笑 ¹ ; 郭振华 ¹ ; 邢广旭 ¹ ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.河南省农业科学院农业经济与信息研究所

关键词： 禽腺病毒血清4型;Hexon基因;荧光定量PCR;检测

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2022 年 012 期

页码： 131-138

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立禽腺病毒血清4型（Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4）临床检测方法，根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物，将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体，构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon，同时对Hexon基因进行分析，选取高度保守区域，设计荧光定量检测引物，建立FAdV4 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。该方法扩增产物长度为95 bp，最低检测下限为7.1×10~2拷贝/μL，且与其他禽源病毒无交叉反应，批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%，具有良好的特异性和重复性。将建立的检测方法应用于检测FAdV4在鸡肝癌细胞（Leghorn male hepatocellular cells,LMH）上的增殖特性，并与TCID₅₀法测定的病毒滴度进行比较，结果显示，2种检测方法具有良好的相关性。综上，本研究建立的检测方法可用于FAdV4的临床早期快速检测。