文献类型： 中文期刊

作者： 曹光诚 ¹ ; 孙勇如 ² ; 陈占宽 ² ; 赵世民 ² ; 舒群芳 ² ; 马江生 ² ; 张利明 ² ; 李文彬 ² ;

作者机构： 1.中国科学院遗传研究所

2.中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,河南省农业科学院实验中心,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所,中国科学院遗传研究所 北京 100101,北京 100101,北京 100101,北京 100101,北京 100101,北京 100101,北京 100101

关键词： 人工雄性不育;育性恢复;烟草;TA29启动子;Barnase基因;Barstar基因;多聚酶链式反应(PCR)

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 1996 年 29 卷 03 期

页码： 20-26

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文报道了用于获得人工雄性不育系的质粒pTABNBAR55和用于获得人工恢复系的质粒pTABSBAR23的构建。用PCR的方法从烟草(Nicotiana tabacum cv.Samsun)中扩增了花药绒毡层特异表达TA29基因上游—291～+12共303bp的片段,称作TA29启动子(简写作pTA29);从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)中扩增了一种RNA酶及其特异抑制剂基因barnase和barstar。DNA序列分析表明,pTA29和barstar片段均与已发表的序列完全一致,barnase片段在3′端和已见报道的两种序列都有一个碱基的差异,但由此推断的氨基酸序列是一致的,不影响其在植物中的表达。把TA29启动子分别与barnase和barstar基因连接起来构成两个嵌合基因pTA29-barnase和pTA29-barstar,在这两个嵌合基因的3′端加上了260bp的Nos终止子(Nos.ter)以增强其在植物中的表达。然后将一个2.0kb的完整除草剂抗性标记“bar cassettee”插在含有这两个基因的质粒上,作为转化和制种过程的筛选标记。若将前者导入欲作杂交制种母本的植物中,可以获得雄性不育系;后者导入欲作父本的植物中,可获得恢复系。