文献类型： 中文期刊
作者： 邹芝英 1 ; 王茂元 1 ; 李大宇 1 ; 杨弘 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室
关键词： 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus);β-肌动蛋白;启动子;绿色荧光蛋白;转染
期刊名称： 淡水渔业
ISSN： 1000-6907
年卷期： 2011 年 41 卷 01 期
页码： 80-84
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP在细胞中的表达情况。结果显示:β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺式作用元件。荧光显微镜下观察到50%～60%的HEK 293T细胞中发出绿色荧光,显示尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的转录和表达,具有较好的活性,为构建"全鱼"转基因罗非鱼的研究奠定基础。
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