文献类型： 中文期刊

作者： 李宇鹏 ¹ ; 李运川 ² ; 钱嘉莉 ² ; 刘诗雨 ² ; 谢景媛 ² ; 宋旭 ² ; 王祎 ² ; 郭容利 ² ; 范宝超 ² ; 索朗斯珠 ³ ; 李彬 ² ;

作者机构： 1.西藏农牧学院动物科学学院

2.江苏省农业科学院兽医研究所

3.西藏大学农牧学院

关键词： PEDV;S1蛋白;单克隆抗体;抗原表位

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 004 期

页码： 470-476

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研制针对PEDV S1蛋白单克隆抗体，为下一步应用研究奠定材料基础，本研究构建了表达三聚化形态的S1蛋白的重组质粒，利用HEK 293T细胞表达并纯化获得S1蛋白，经免疫小鼠后，制备并筛选分泌S1特异性单克隆抗体的杂交瘤B细胞，制备腹水后利用间接ELISA法测定了腹水效价及单抗的亚型；通过SDS-PAGE、Western-blot、间接免疫荧光试验分析制备抗体与病毒S蛋白的特异性结合能力。结果显示，成功表达和纯化三聚化PEDV重组S1蛋白，通过免疫制备筛选了15株特异性识别病毒S蛋白的单克隆抗体。15株单克隆抗体的重链为Ig G1型11株，Ig G2b型3株，32#抗体未检测到分型结果。除25#抗体未检测到轻链结构外，其余抗体轻链均为kappa链。Western-blot和间接免疫荧光分析表明制备抗体与病毒S蛋白特异性反应。功能域结合试验表明抗体20#、21#、31#与S1 D0区域反应，抗体9#、16#、25#与S1 NTD反应，抗体15#、27#、37#与S1 SD2反应，所制备抗体均无病毒中和活性。结果表明，本研究成功制备了多株可特异性识别PEDVS1蛋白的单克隆抗体，为病毒感染机制研究及免疫学诊断研究提供了重要的生物材料。