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桃蚜基因组DNA提取及SSR反应体系优化和应用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘永刚 1 ; 漆永红 1 ; 赵丽娟 2 ; 吕和平 1 ;

作者机构： 1.甘肃省农业科学院植物保护研究所

2.甘肃省农业科学院生物技术研究所

关键词： 桃蚜;基因组DNA;提取方法;SSR;体系优化

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2009 年 35 卷 04 期

页码： 96-100

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对蚜虫体型微小,体表有外骨骼等特点对改进的醋酸钾(KAC)法作了优化,优化后的方法可在常温条件下更加简易和有效地提取高质量的单头蚜虫基因组DNA,结果表明,DNA样品的A260/280值普遍在1.6~1.9之间,电泳检测基因组DNA纯度和完整性较好。同时在20μL的反应体系中将PCR的5个主要成分分别设定10个浓度梯度,研究了适合桃蚜SSR分子标记的优化体系,结果表明,最适宜的优化浓度分别为:1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTP,1.0UTaq酶,40 ng/μL模板DNA,25 ng/μL引物。利用甘肃省酒泉地区马铃薯桃蚜来验证此优化体系,30%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物大多在100~300 bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好。

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