文献类型： 中文期刊

作者： 李红梅 ¹ ; 贺聪 ² ; 张茂 ³ ; 孟轩 ² ; 张建峰 ² ; 张健騑 ² ; 郭鹏举 ² ;

作者机构： 1.华南农业大学动物科学学院

2.广东省农业科学院动物卫生研究所公共实验室

3.广东省农业科学院动物科学研究所

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;RNA干扰;抗猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞株

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2013 年 40 卷 12 期

页码： 12-20

收录情况： 北大核心

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。