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副猪嗜血杆菌CDT亚基原核表达及其抗原性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 李军星 1 ; 王一成 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 曹会敏 1 ; 申世川 1 ; 张鲁滨 1 ;

作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 副猪嗜血杆菌;重组CDT亚基;原核表达;抗原性

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2012 年 34 卷 09 期

页码: 746-748

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为原核表达副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT毒素并检测其在体外培养时的分泌表达情况,本实验将切除信号肽的CDT毒素的3个亚基基因分别克隆于pET-28a载体中在大肠杆菌进行表达,并将重组蛋白经亲和层析纯化后,免疫兔制备抗血清,用于鉴定H.parasuis体外培养时CDT分泌表达情况。结果表明CDT毒素3个亚基均在Rosetta菌株中得到表达,其中cdtB约为28.2 ku,符合预期大小,而cdtA和cdtC亚基比预期的23.5 ku和17.4 ku略大。表达的3个重组蛋白可以被自然感染猪血清识别,表明其具有良好的反应原性,同时也表明H.parasuis在猪体内定殖或感染过程中分泌CDT。制备的抗血清可以与体外培养H.parasuis的分泌蛋白中的CDT亚基反应,表明重组蛋白具有良好的免疫原性,同时也表明H.parasuis体外培养时也分泌CDT。

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