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木薯MeWRKY12基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及验证

文献类型: 中文期刊

作者: 郭文雅 1 ; 王海 2 ; 王亚杰 1 ; 张彤 1 ; 姚远 3 ; 郭建春 3 ; 耿梦婷 1 ; 陈银华 1 ;

作者机构: 1.海南大学生命科学与药学院

2.海南恩红农业科技有限公司

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: CRISPR/Cas9;木薯;MeWRKY12基因

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2022 年 20 卷 005 期

页码: 1554-1559

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 植物WRKY转录因子可参与植物对重金属离子的胁迫响应过程,木薯MeWRKY12基因表达受到镉(Cd)、铅(Pb)离子胁迫诱导.本研究利用在线软件CRISPR-P v2.0设计了 MeWRKY12基因的编辑靶点,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体pCAMBIA1301-Cas9-MeWRKY12-sgRNA,并将该载体转化、侵染木薯脆性胚性愈伤组织.PCR扩增基因靶点及潜在的脱靶位点区域序列,并进行Sanger测序分析序列变化情况.结果表明,MeWRKY12基因被成功编辑,且没有脱靶现象.本研究有助于进一步获得MeWRKY12基因突变体,为解析MeWRKY12转录因子调控木薯响应Cd、Pb胁迫的分子机理打下基础.

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