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核盘菌诱导下甘蓝型油菜宁RS-1的SSH文库构建

文献类型： 中文期刊

作者： 周晓婴 1 ; 陈松 1 ; 戚存扣 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院经济作物研究所

关键词： 甘蓝型油菜;核盘菌;抑制消减杂交;cDNA文库

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2011 年 33 卷 02 期

页码： 157-161

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以甘蓝型油菜宁RS-1为材料,用核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)对幼苗进行接种,提取经核盘菌诱导前和诱导后的宁RS-1叶片mRNA,经反转录成cDNA,以及经过酶解后加接头和两次杂交,构建差异表达的抑制消减(SSH)cDNA文库。正向消减文库是以诱导后的宁RS-1 cDNA为tester,以正常的宁RS-1 cD-NA为driver。所构建的正向文库重组率达到96.2%,反向文库重组率达到94.5%,文库容量均达到了2 190和2 780,表明所构建的文库质量良好。对从文库中随机挑取的克隆进行测序分析,获得了与抗病和代谢有关的基因,如γ-谷氨酰半胱氨酸酶基因、抗真菌蛋白基因、铁蛋白基因、ACC氧化酶基因等,为开展油菜抗菌核病重要功能基因的克隆和鉴定奠定了基础。

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