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猪伪狂犬病毒Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 郑敏 1 ; 毛凝 1 ; 黄梅清 1 ; 陈仕龙 1 ; 陈少莺 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 猪伪狂犬病毒(PRV);TaqMan-MGB;荧光定量PCR

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2013 年 29 卷 17 期

页码: 37-41

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 建立可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。根据猪伪狂犬病病毒gE基因序列,设计一对特异引物和探针,通过优化反应条件,建立了可区分猪伪狂犬野毒株及基因缺失疫苗株的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法,同时验证该方法的特异性、敏感性、重复性,并对30份疑似病料进行临床检测。本研究所建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法灵敏度可达2.23×10拷贝/μL,比常规PCR检测方法高100倍;与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应,具有高特异性;对30份疑似病料的TaqMan荧光定量PCR和普通PCR检测阳性率分别为40%和33%,两者符合率90%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测大量样品,可适合于PRV的临床诊断和流行病学调查。

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