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假臭草DNA提取及RAPD反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 李传军 1 ; 杨礼富 1 ; 王孝钢 2 ; 袁坤 1 ; 陈秋波 1 ; 易晓洁 1 ; 王真辉 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室

2.农业部农产品质量安全监督检验测试中心(青岛)

关键词: 假臭草;DNA提取;RAPD;体系优化

期刊名称: 热带农业科学

ISSN: 1009-2196

年卷期: 2010 年 30 卷 05 期

页码: 21-25

摘要: 以假臭草叶片为材料,对影响其随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立了假臭草RAPD的优化反应体系和程序,即在10μL反应体系中,5ng(/10μL)模板DNA,1.0μmol/L随机引物F15,150μmol/LdNTPs,2.0mmol/LMg2+,1.0UTaqDNA聚合酶;扩增程序为95℃预变性4min,95℃变性40s,36℃退火40s,72℃延伸1min,10个循环,后94℃变性30s,35℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环,72℃延伸5min,4℃保温。

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