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中国对虾生物量评估的环境DNA检测技术的建立及优化

文献类型: 中文期刊

作者: 李苗 1 ; 单秀娟 1 ; 王伟继 1 ; 吕丁 1 ; 戴芳群 1 ; 丁小松 1 ; 吴欢欢 1 ;

作者机构: 1.上海海洋大学海洋科学学院;农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室山东省渔业资源与生态环境重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室;上海海洋大学水产与生命学院

关键词: 中国对虾;eDNA;建立;优化

期刊名称: 渔业科学进展

ISSN: 2095-9869

年卷期: 2019 年 01 期

页码: 12-19

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 近年来,环境DNA(Environmental DNA, eDNA)技术作为一种新的水生生物调查方法发展迅速,在水生生态系统的研究领域被广泛应用到物种检测、生物多样性评价、生物量评估等方面。然而,很少有研究专门评价e DNA技术操作流程中不同的eDNA富集方法与提取方法对研究结果的影响,从而针对具体研究对象建立一套最佳的eDNA技术操作流程。此外,由于物种间生活习性的差异,不同物种释放到环境中的DNA量及DNA片段大小不同,因而,针对不同研究对象需采用不同的eDNA富集与提取方法。本研究以中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)为研究对象,采用滤膜法富集eDNA,结合血液与组织DNA提取试剂盒提取e DNA。选取直径为47 mm的玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、聚碳酸酯膜、尼龙膜共4种材质的滤膜,每种滤膜根据其孔径大小设置0.45、0.8、1.2、5μm共4个梯度,取样水量设置500 ml、1 L、2 L共3个梯度。结果显示,滤膜材质、滤膜孔径大小及取样水体体积均对中国对虾的定性与定量分析具有一定的影响,其中,0.45μm的玻璃纤维滤膜过滤2 L水样能够检测到的DNA拷贝数最多,并依据此建立了一套中国对虾e DNA技术的操作流程,提高了中国对虾的检出率,为后续中国对虾的分布监测及生物量评估提供了基础。

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