文献类型: 中文期刊
作者: 张朋艳 1 ; 于雪 1 ; 姚建亭 1 ; 段德麟 1 ;
作者机构: 1.中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室
关键词: 海带;磷酸甘露糖变位酶;岩藻聚糖;褐藻胶;实时定量PCR分析
期刊名称: 海洋科学
ISSN: 1000-3096
年卷期: 2016 年 40 卷 03 期
页码: 32-39
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 磷酸甘露糖变位酶(PMM)是褐藻胶和岩藻聚糖合成过程中的关键酶之一。本研究利用c DNA末端快速克隆(RACE)技术,获得2条海带PMM基因(Sjpmm1,Sjpmm2)序列。其中,Sjpmm1的开放阅读框(ORF)长759 bp,其编码的Sj PMM1为卤酸脱卤酶(HAD)超家族成员,含252个氨基酸,分子量约为28.51 k Da;而Sjpmm2的ORF长1866 bp,其编码的Sj PMM2属于磷酸己糖变位酶超家族的成员,含621个氨基酸,分子量约为66.49 k Da。海带PMM的二级结构均以?-螺旋为主。进化分析表明,Sjpmm1来自于原始真核生物,而Sjpmm2来源于质体的第一次内共生作用。实时定量PCR分析发现,海带受到高温或低温胁迫时,Sjpmm1和Sjpmm2转录水平上升,以合成岩藻聚糖抵抗环境影响。此外,利用p MAL-c5X载体对Sj PMM1进行体外表达,得到高浓度的可溶性融合蛋白,为后续的Sj PMM功能分析提供基础。
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