文献类型： 中文期刊

作者： 王艳丽 ¹ ; 叶兴国 ¹ ; 董芳 ² ; 乔卫华 ³ ; 陶丽莉 ¹ ; 李晓璐 ⁴ ; 许兴 ⁵ ;

作者机构： 1.中国农业科学院作物科学研究所

2.宁夏大学农学院

3.山东农业大学生命科学院

4.北京工商大学化工学院

5.宁夏农业生物技术重点实验室

关键词： 草坪草;农杆菌转化法;GUS基因瞬时表达;分子检测

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2007 年 27 卷 01 期

页码： 22-27

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用C58C1农杆菌菌系(携带的表达载体上含GUS基因和nptII基因)感染4个草坪草品种追寻者、爱神特、腾跃和守门员成熟胚来源的愈伤组织,共培养后部分愈伤组织进行X-Gluc组织化学染色检测,其余愈伤组织在含G41810～25mg/L的MS改良培养上先后筛选抗性愈伤组织和分化抗性再生植株,对移栽成活的144棵抗性再生植株分别进行了ELISA检测、PCR检测和组织化学染色检测。愈伤组织阶段X-Gluc染色检测结果表明,4个草坪草品种GUS基因瞬间表达率8.6%～46.9%,爱神特愈伤组织对农杆菌侵染最为敏感,其次是腾跃和守门员,追寻者最不敏感;ELISA检测结果表明,45株呈现阳性,证明nptII基因已转入草坪草并已表达;PCR检测结果与ELISA检测结果一致,表明nptII基因确实已经整合到了草坪草基因组中,且没有发生沉默现象;转基因植株X-Gluc染色检测结果表明,GUS基因在43株中得到了稳定表达,在2株中发生了沉默现象。4个草坪草品种抗性再生植株分化率0%～43.5%,转化率0%～21.5%。结果还表明,GUS基因瞬间表达率与稳定转化率在草坪草上很不一致,不能作为衡量基因型转化效果的指标。