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同源重组法构建枯草芽孢杆菌dhbC基因缺失突变株和回复株

文献类型: 中文期刊

作者: 余贤美 1 ; 林超 2 ; 杨芩 2 ; 李锐 2 ; 贺春萍 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

2.海南大学环境与植物保护学院

关键词: 枯草芽孢杆菌;同源重组;缺失突变;基因回复

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2009 年 30 卷 10 期

页码: 133-137

收录情况: CSCD

摘要: 为了验证dhbC基因的功能,以质粒pEGFP-N1为模板,通过PCR扩增获得新霉素抗性基因(neor)DNA片段,构建重组质粒pMD18-neo,电击转化法将pMD18-neo导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CAS15感受态细胞中,使neor基因片段与dhbC基因片段发生置换,获得dhbC基因缺失突变株。再通过电击转化将dhbC基因全长编码序列导入dhbC基因缺失突变株CAS15 dhbC-del,获得dhbC基因回复株CAS15dhbC-com。经CAS平板法检测表明,CAS15 dhbC-del不能产生橘黄色晕圈,而CAS15 dhbC-com产生与CAS一致的橘黄色晕圈,证明了dhbC基因与嗜铁素的合成密切相关。

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