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莱茵衣藻E2泛素结合酶CrUBC23调控油脂积累

文献类型： 中文期刊

作者： 李兴涵 1 ; 费小雯 1 ; 李亚军 1 ; 邓晓东 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室;海南医学院基础医学与生命科学学院

关键词： 莱茵衣藻;E2泛素结合酶;基因沉默;亚细胞定位

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 499-511

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】为研究莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)泛素结合酶(ubiquitin-conjugatingenzymes,E2) CrUBC23在莱茵衣藻油脂代谢中的作用,为高产油微藻基因工程改良和揭示藻类油脂合成及代谢调控机理奠定基础。【方法】qRT-PCR分析莱茵衣藻在低氮、低磷胁迫下泛素结合酶CrUBC23表达情况;克隆CrUBC23同源基因干涉片段和全长基因,构建RNAi干涉载体和过量表达载体,转化莱茵衣藻并检测生物量和油脂含量;构建CrUBC23-GFP融合表达载体,用农杆菌浸染洋葱表皮细胞进行亚细胞定位。【结果】莱茵衣藻在低氮、低磷胁迫下CrUBC23基因表达量显著增加,增加幅度分别为正常培养的4.98–5.80倍和1.85–5.20倍。RNAi干扰结果显示,转基因藻细胞中性脂含量降低5.5%,总脂含量降低3.16%–17.6%。过量表达结果显示,转基因藻细胞中性脂含量增加8.8%,总脂含量增加4.51%–14.03%。【结论】CrUBC23正向调控莱茵衣藻油脂代谢,该基因定位于细胞核。

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