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柱花草杂交后代育性分离群体ISSR-PCR反应体系的优化与确立

文献类型： 中文期刊

作者： 张子雄 1 ; 黄春琼 1 ; 刘国道 1 ; 白昌军 1 ; 唐军 1 ; 王文强 1 ;

作者机构： 1.海南大学热带农林学院;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词： 柱花草;育性分离群体;ISSR-PCR;正交设计;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 09 期

页码： 2907-2913

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究为了优化确立柱花草(Stylosanthesguianensis)杂交后代育性分离群体ISSR-PCR反应体系。利用正交设计试验,从模板DNA和引物2个因素、4个水平对柱花草杂交后代育性分离群体ISSR-PCR反应体系进行优化试验。结果表明:反应体系中模板DNA 75 ng,ISSR引物10μmol/L,2×EasyTaq PCR SuperMix for PAGE(含染料)7.5μL时扩增效果最好。并通过对柱花草杂交后代育性分离群体ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到引物UBC834的最佳退火温度为54.4℃。该反应体系在柱花草BC_1F_1代不育可育分离群体中获得较好的扩增结果,该优化体系为后续筛选与柱花草花粉不育基因连锁的分子标记提供了稳定和可靠参考。

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