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THP基因的重新克隆及草菇表达载体的构建

文献类型： 会议论文

第一作者： 郭丽琼

作者： 郭丽琼 1 ; 林俊芳 1 ; 陈守才 1 ; 熊盛 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室(海南海口)

关键词： 草菇;THP基因;草菇表达载体;PCR技术

会议名称： 全国第六届食用菌学术研讨会

主办单位： 中国农学会%中国菌物学会

页码： 97-100,108

摘要： 采用PCR技术,以Primer AFP1和Primer AFP2为引物,克隆了连接在未知载体上的THP基因并重新连接在pGEMR T-Vector上,形成质粒pGTHP4.以限制性内切酶BstEⅡ和NcoⅠ双酶切质粒pCAMBIA1301.1℅琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物并以凝胶DNA提取纯化Kit回收带有启动子的大片段;以限制性内切酶BstZⅠ和NcoⅠ双酶切质粒pGTGP4之后,以相同的方法回收带有THP目的基因的小片段;大片段和小片段在T4 DNA连接酶的作用下首先进行NcoⅠ酶切的两个匹配粘性末端的连接,回收连接产物后加入特定接头和T4 DNA连接酶进行连接环化,结果构建了带有THP目的的基因的草菇表达载体pCTH526.

分类号： S646.13`S601

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[1]THP基因的重新克隆及草菇表达载体的构建. 郭丽琼,林俊芳,陈守才,熊盛. 2002

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