文献类型: 会议论文
第一作者: 孙惠玲
作者: 孙惠玲 1 ; 汪明 1 ; 王云峰 2 ; 苗得园 3 ; 张培君 3 ; 智海东 2 ; 徐灵龙 2 ; 王玫 2 ; 童光志 4 ;
作者机构: 1.中国农业大学动物医学院,北京 100094
2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨 150001
3.北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京 100094
4.中国农业大学动物医学院,北京 100094 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨 150001
关键词: 鸡痘病毒;新城疫病毒;传染性喉气管炎病毒;免疫荧光;启动子
会议名称: 2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
主办单位: 中国畜牧兽医学会;中国微生物学会
页码: 517-524
摘要: 利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区,其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下,大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下。经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒,称为rFPV-F/HN/gB/LacZ。经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因;间接免疫荧光试验和Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTV gB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ感染的CEF细胞中获得表达。与亲本毒相比,重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同。本研究证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因,为制备多价基因工程疫苗奠定了基础。
分类号: S858.31`S855.3
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