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Modesto株副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定

文献类型： 会议论文

第一作者： 王宏俊

作者： 王宏俊 1 ; 孙惠玲 1 ; 龚玉梅 1 ; 陈小玲 1 ; 张培君 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 北京 100097

关键词： 副鸡禽杆菌;血凝素;原核表达;生物活性

会议名称： 2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会;中国微生物学会

页码： 419-423

摘要： 目的：克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌的血凝素基因，鉴定该重组血凝素的生物学活性。 方法：根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的血凝素基因序列，设计合成了1对特异性引物，克隆Apg血凝素基因。以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板，利用PCR扩增Apg血凝素全长基因(1026bp)，将其克隆到pET-32a(+)载体上，构建了pET-HA原核表达载体pET-HA，表达并纯化重组蛋白，通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。 结果：表达并纯化了Apg HA重组血凝素蛋白，该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合，并且可以凝集鸡红细胞。 结论：成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体，并表达纯化了Apg-HA融合蛋白，该重组血凝素具有凝集鸡红细胞的活性，为进一步研究Apg-HA的免疫功能奠定基础。

分类号： S858.31

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