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“红地球”葡萄过量表达DREB1b基因可以提高抗寒性

文献类型： 会议论文

第一作者：

作者： 金万梅 1 ;

作者机构： 1.金万梅@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--董静@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--张玉平@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--潘清华@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--李少宁@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--陈梅香@北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093--

关键词： 葡萄栽培;抗寒性;基因表达;转基因葡萄;无性繁殖

会议名称： 中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会

主办单位： 中国生物化学与分子生物学会

页码： 30-31

摘要： 本文以葡萄栽培品种“红地球”为试材，选取六周非木质化的茎梢，切成含腋芽的茎段，无菌处理后，外植体接种在MS(Murashige and Skoog 1962)附加3%蔗搪以及BAP(O.5mg/L,)和IBA(0.2mg/L)培养基上，建立试管苗无性繁殖系。采用CTAB法提取植物总DNA，PCR扩增的引物分别为DREB1 b-F,5'-GTACTCTAGTCAATTGAGACTC-3'；DREBIb-R, 5'-GAAACGACTATCGAATATTAG-3'；PCR反应体系：3.5μ110ng模板DNA，其余混合液16.5μl含1.5 mM MgCl2,1U Taq polymerase，200μM dMP,1 x Taq polymerase buffer，1pM的the primers。扩增程序：94℃4min；94℃30s, 55℃1min,72℃1min,35循环；72℃6min。扩增产物1 x TAE中含1.5%(w/v)琼脂糖电泳,EB(ethidium bromide)染色，紫外灯下观察照相。试验结果发现，PCR阳性株系均有阳性信号，对照无杂交信号，进一步证实外源目的基因DREBIb在RNA水平上发生了转录。并评价了转基因葡萄的抗寒性。

分类号： S663.1

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