文献类型: 会议论文
第一作者: 路斌
作者: 路斌 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 李军星 1 ; 王一成 1 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 浙江杭州 310021
关键词: CSFV;PRRSV;JEV;二重二温式PCR;三重二温式PCR
会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会
主办单位: 中国畜牧兽医学会
页码: 463-468
摘要: 通过对Genbank登录的CSFV.PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,目的片断大小分别为CSFV(482bp)、PRRSV(576bp)和JEV(375bp),通过对PCR反应条件的优化,确定了最佳引物浓度、最佳Mg2+浓度和最佳退火温度。将传统三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,从而大大节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对CSFV、PRRSV及JEV三种猪主要RNA病毒病进行检测。经验证该方法具有良好的敏感性、特异性和稳定性。因此,该方法对CSFV、PRRSV和JEV的快速准确诊断以及流行病学调查提供技术手段。
分类号: S858.28`S852.659.4
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