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一步法RT-PCR扩增PRSV海南分离物全长基因组cDNA

文献类型： 会议论文

第一作者： 庹德财

作者： 庹德财 1 ; 沈文涛 2 ; 高乐 1 ; 言普 2 ; 周鹏 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所，分析测试中心海口 571101 海南大学农学院 海口 570228

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所，分析测试中心海口 571101

关键词： 番木瓜环斑病病毒;全长基因组cDNA;基因克隆

会议名称： 海南省第三届生命科学学术交流大会

主办单位： 海南省科协;海南省遗传学会

页码： 410-417

摘要： 为了研究番木瓜环斑病病毒海南分离物(PRSV HN-2)的全部核苷酸序列，应用桓物总RNA提取试剂盒获得了高纯度的总RNA，使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物合成了cDNA的第一链.基于已报道的PRSV全长基因组序列，设计合成了一对引物，一步法RT-PCR扩增出PRSV海南分离物全长基因组cDNA。为了验证获得的全长基因组cDNA的正确性，以扩增出的全长cDNA为模板，将PRSV全长基因组分成A和B两个大片段进行扩增，并应用T载体进行了克隆和测序，测序结果显示，其与国内外报道的PRSVy分离物全长核苷酸序列的相似性很高，表明本文建立的一步法RT—PCR扩增PRSV全长基因组cDNA的方法正确、可行。

分类号： S436.67

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[1]一步法RT-PCR扩增PRSV海南分离物全长基因组cDNA. 庹德财,沈文涛,高乐,言普,周鹏. 2011

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