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H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

文献类型: 会议论文

第一作者: 苏霞

作者: 苏霞 1 ; 杨兵 2 ; 周宏专 2 ; 曾作财 2 ; 孙继国 3 ; 孙丹丹 1 ; 陈小玲 2 ;

作者机构: 1.河北农业大学动物科技学院,保定 071000 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京 100097

3.河北农业大学动物科技学院,保定 071000

关键词: 猪流感病毒;快速检测;环介导等温扩增;基因序列

会议名称: 第五届北京畜牧兽医领域青年科技工作者“新思想、新观点、新方法”论坛

主办单位: 北京畜牧兽医学会

页码: 35-42

摘要: 目的:建立H1N1猪流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法:从GenBank中获得H1N1猪流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物和内引物,同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板,对试验中的几个反应条件进行优化。结果:LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4~6个拷贝,其引物对于H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒均无非特异性扩增,表现出良好的特异性。结论:建立的H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测猪流感病毒提供了新方法和新思路。

分类号: S858.28

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