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IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

文献类型: 会议论文

第一作者: 周宇

作者: 周宇 1 ; 王永山 2 ; 范红结 3 ; 欧阳伟 4 ; 唐雨德 5 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014 南京农 业大学动物医学院,南京 210095

2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014

3.南京农业大学动物医学院,南京 210095

4.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014 南京 农业大学动物医学院,南京 210095

5.南京

关键词: 传染性法氏囊病病毒;VP2基因;抗原表位;组合基因;质粒表达

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展论坛

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 778-785

摘要: 运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与、VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHT中,转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBacHT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBacHT-VP2-5e。对vBacHT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59kD处出现一条特异性蛋白条带。本实验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

分类号: S852.65

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