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1型鸭疫里默氏杆菌外膜磷脂酶A(RaOMPLA)基因的功能研究

文献类型: 会议论文

第一作者: 廖申权

作者: 廖申权 1 ; 袁建丰 1 ; 覃宗华 1 ; 蔡建平 1 ; 谢明权 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室,广州 510640

关键词: 鸭疫里默氏杆菌;外膜磷脂酶A基因;氨基酸序列;致病因子

会议名称: 第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

主办单位: 中国畜牧兽医学会禽病学分会

页码: 319-320

摘要: 为进一步了解鸭疫里默氏杆菌外膜磷脂酶A(RaOMPLA)基因的功能,本研究根据NCBI上己发表OMPLA的氨基酸序列(由pldA基因编码),利用生物信息学方法分析其保守结构序列,应用CODEHOP在线软件设计简并引物,PCR扩增获得一长428 bp的RapldA基因部分序列;根据此序列与其它细菌的pldA基因序列进行比对分析,参照E.coli pldA基因序列设计上下游延伸引物,扩增获得了一长3400 bp的序列。生物信息学分析显示RapldA基因的完整ORF为870 bp,推导氨基酸为289 aa,与其它物种OMPLA氨基酸序列的相似性最高为99%。本研究首次克隆获得并重组表达了pldA基因,重组表达产物rRaOMPLA具有磷脂酶A的水解活性,MAFP对rRaOMPLA的体外酶活性具有抑制作用,以同源重组的方法构建突变体RaΔplpA::erm,对其生物学特性的研究发现突变体的毒力较亲本株有所下降,证实RaOMPLA是R.anatipestifer的潜在致病因子。

分类号: S858.32:S852.65

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