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禽呼肠孤病毒σC基因的克隆和表达及ELISA抗体检测方法的建立

文献类型： 会议论文

第一作者： 董嘉文

作者： 董嘉文 1 ; 孙敏华 1 ; 李林林 1 ; 胡奇林 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东　广州,510640

关键词： 禽呼肠孤病毒;σC基因;抗体检测;酶联免疫吸附法

会议名称： 第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

主办单位： 中国畜牧兽医学会禽病学分会

页码： 395-403

摘要： 将扩增得到的禽呼肠孤病毒(ARV)S1133毒株的σC基因克隆至pMD-18T-Simple载体，经酶切及测序鉴定，证明该基因片段为ARV σC基因。将该基因亚克隆至pET32a(+)成功构建了表达载体pET32a-σC。该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1.Ommol/L IPTG诱导5 h得到最佳表达。pET32a-σC蛋白的相对分子质量为55KD，Western-blot 分析表明，该重组蛋白能与ARV阳性血清发生特异性反应，表明其具有良好的反应原性。将纯化好的ARVσC蛋白作为包被抗原，确定了该方法的抗原最适包被浓度为2μg/mL，血清的最适稀释度为1:400。用建立的ELISA方法检测接种过ARV疫苗的65份临床血清样品，测得44份为阳性。阳性率为67.7％；未接种过的ARV疫苗30份血清样品检测结果均为阴性。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]禽呼肠病毒σC基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立. 董嘉文,孙敏华,李林林,胡奇林. 2012

[2]禽呼肠孤病毒RT-LAMP快速检测方法的建立. 董嘉文,孙敏华,尚毅,胡奇林. 2011

[3]广东地区蓝舌病流行病学初步研究. 吕敏娜,林丽琴,陈琴苓,张健(騑),廖申权,李娟,戚南山,李华春,吴彩艳. 2015

[4]猪伪狂犬病毒抗体检测方法的研究进展. 卢立康,许楷惠,黄元,蔡汝建,王晓虎,陈晶,向华. 2024

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